四環(huán)牌ME-壓力蒸汽滅菌生物指示菌片是由嗜熱脂肪桿菌（ATCC7953）芽孢和濾紙片組成。菌片回收菌量為5.0×105cfu/片～5.0×106cfu/片。生物指示菌片的抗力符合國際標(biāo)準(zhǔn)和國家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定：在121℃飽和蒸汽作用下，存活時間≥3.9min，殺滅時間≤19min，D10值1.3min～1.9min。

【型號】指示菌片

【使用范圍】適用于醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)、制藥工業(yè)和醫(yī)院制劑生產(chǎn)等各行業(yè)使用的121℃下排氣式壓力蒸汽滅菌器、132℃～134℃預(yù)真空或脈動真空壓力蒸汽滅菌器、小型壓力蒸汽滅菌器等滅菌效果的監(jiān)測。

【使用方法】

1.使用時，將用小紙袋包裝好的生物指示菌片按要求放在標(biāo)準(zhǔn)測試包的中心或物品包的中心，置于滅菌器內(nèi)最難消毒的位置，按規(guī)定的滅菌溫度和時間進行滅菌處理。檢驗同時設(shè)生物指示菌片陽性對照，陽性對照生物指示菌片放室溫下，不進行滅菌處理。

2.滅菌完畢，在無菌操作下取出小紙袋中的生物指示菌片，投放到恢復(fù)培養(yǎng)基溶液管中。同時將未經(jīng)滅菌的生物指示菌片投入另一管恢復(fù)培養(yǎng)基溶液中作陽性對照。置于56℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)或配套的微型培養(yǎng)器內(nèi)培養(yǎng)24h～48h觀察初步結(jié)果，無菌生長時應(yīng)在第7d觀察最終結(jié)果。

【結(jié)果判定】

培養(yǎng)后生物指示菌片培養(yǎng)管中的恢復(fù)培養(yǎng)基溶液由紫色澄清液體變?yōu)辄S色澄清液體即表示有菌生長，判定為滅菌不合格；恢復(fù)培養(yǎng)基溶液仍為紫色澄清液體為無菌生長；同時陽性對照生物指示菌片生長正常即恢復(fù)培養(yǎng)基溶液由紫色澄清液體變?yōu)辄S色澄清液體，判定為滅菌合格。

【注意事項】

1.恢復(fù)培養(yǎng)基溶液的pH值應(yīng)≥7.2但≤7.4，pH值＞7.5時，嗜熱脂肪桿菌芽孢生長不良。

2.培養(yǎng)溫度須在56℃～60℃之間，否則可導(dǎo)致嗜熱脂肪桿菌芽孢生長不良，或不能生長。

3.滅菌處理后，恢復(fù)培養(yǎng)基溶液顏色與壓力蒸汽滅菌前比較會變淺，呈現(xiàn)淺紫色，這種變化屬正常現(xiàn)象。

4.菌片被完全浸沒于恢復(fù)培養(yǎng)基溶液后，用手輕輕振搖，使菌片浸入恢復(fù)培養(yǎng)基溶液中，有利于存活細(xì)菌芽孢的生長。

5.用恢復(fù)培養(yǎng)基溶液在56℃培養(yǎng)時間過長（72h以上），陽性對照管中恢復(fù)培養(yǎng)基溶液的黃色容易消退，導(dǎo)致無法準(zhǔn)確判斷結(jié)果；所以應(yīng)注意每天觀察，隨時記錄培養(yǎng)結(jié)果。

6.本生物指示菌片應(yīng)保存于4℃冰箱內(nèi)。

【有效期】12個月。

【包裝規(guī)格】50片/包。

附：恢復(fù)性培養(yǎng)基溶液的制備

【培養(yǎng)基配方】胰蛋白胨10g、葡萄糖5g、可溶性淀粉1g、蒸餾水和1.6%溴甲酚紫乙醇溶液指示劑。

【配制方法】

1.用玻璃燒杯取少許蒸餾水,加入可溶性淀粉1g,加熱煮沸使其完全溶解。

2.取胰蛋白胨10g和葡萄糖5g溶解于900ml蒸餾水中，完全溶解后，加入變冷的淀粉溶液和1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1.0ml，振搖混勻后，調(diào)節(jié)pH至7.2～7.4，補充蒸餾水至1000ml,分裝（每管5ml），置121℃壓力蒸汽滅菌20min或115℃壓力蒸汽滅菌30min。放入4℃冰箱內(nèi)保存，備用。

1.6%溴甲酚紫乙醇溶液的配制，取1.6g溴甲酚紫加到98.4ml95％乙醇溶液中搖勻即可。

【注意事項】防止指示劑中乙醇揮發(fā)而使溴甲酚紫含量過高（溴甲酚紫含量過高后可抑制細(xì)菌生長）。